当前位置:首页 > 技术交流 > 最新应用

技术交流

扫描二维码
或添加“GeneGroup003
获取更多最新资讯

商城订购

扫描二维码
或添加“基因商城
手机下单,快人一步

蛋白定量,除了A280 ,您还可以用A205!

版权所有,转载请联系基因市场部
2019-08-12

大伙儿都知道,采用吸收光法在280nm处可以非常简单快速的进行已知消光系数的纯化蛋白的定量检测。但是呢,采用该方法的前提是:蛋白中必须含有酪氨酸或色氨酸这样的芳香族氨基酸,才能通过苯环在280nm处的特征吸收进行蛋白质的定量检测。

那么问题来了!如果您要检测的蛋白样品中无芳香族氨基酸可怎么办呢?必须要用比色法如Pierce660、BCA、Bradford、Lowry等方法来定量吗?那您又要做标曲、又要加试剂进行颜色反应,过程好繁琐啊!


NO! 无需比色法,您只需要选择NanoDropOne/OneC的A205法就可以对无芳香族氨基酸的蛋白质/多肽进行定量啦!

NanoDrop One/OneC已经把A205蛋白定量法的应用程序内置到软件内了哦!

A205法原理简介

蛋白质是由肽链组成,而肽链内的氨基酸之间是由氨基和羧基脱水缩合形成肽键连接的,而肽键在深紫外区190nm-220nm处有吸收特性,吸收波峰在205nm处,因此可以通过检测205nm处的吸收光特性来进行蛋白或者多肽的定量检测。

NanoDrop One/OneC A205法检测步骤:

选择Protein A205图标→选择方法31→检测Blank→检测样品→得到结果

(注:没有芳香族氨基酸的蛋白或者多肽的消光系数通常使用31mL/mg*cm。)

是不是操作很简单呢!

选择方法

检测结果

那么A205的方法检测的准确性怎么样呢?我们看一下测试数据吧!

粘菌素(polymyxin)就是这样一个不含酪氨酸和色氨酸的多肽,我们把粘菌素配制成不同浓度的溶液,然后分别用NanoDrop One的基座模式和Evolution 300分光光度计的比色杯模式进行浓度的检测。每个浓度梯度的样品分别在NanoDrop One的基座模式上检测3次,我们看一下在NanoDrop One上检测数据的重复性以及数据在两台仪器上是否一致?

首先我们可以看到采用NanoDrop One 进行A205多肽检测时,在检测的一系列浓度梯度的样品中,同一个样品的标准差≤0.04,说明NanoDrop One 进行A205多肽检测结果的重复性是很好的。

其次,我们将NanoDrop One A205数据和Evolution 300数据进行相关性分析,发现两组数据之间的线性相关系数R2值为0.99923,也就是说在这两台仪器上面检测的数据是非常一致的。

因此,对于无色氨酸和酪氨酸的蛋白或者多肽,也可以采用简单易用的A205吸收光法进行定量检测,结果的重复性和准确性都很优秀哦!

想要了解更多的NanoDrop One/OneC的相关信息,您也可以点击下方链接查看:

超微量分光光度计中的美猴王NanoDrop One——火眼金睛鉴定微量污染物

基因有限公司作为NanoDrop产品中国区独家代理商,为您提供最优质的售后服务保障,让您在使用过程中无后顾之忧,如您想试用NanoDrop One/OneC超微量分光光度计或者想要了解更多,快快联系您身边的基因有限公司员工吧!



欢迎关注“基因快讯”官方微信

沪公网安备 31010402003540号 沪ICP备13000399号-1

大香蕉网-伊人在 大香蕉-大香蕉-大香蕉网站